您的位置 首页 DNA/RNA技术

一文教会你查找基因的启动子、UTR、TSS等区域以及预测转录因子结合位点

基础知识

首先我们了解一些基础知识启动子(promoter):与RNA聚合酶结合并能起始mRNA合成的序列。
转录起始点(TSS):转录时,mRNA链第一个核苷酸相对应DNA链上的碱基,通常为一个嘌呤。UTR(Untranslated Regions):即非翻译区,是信使RNA(mRNA)分子两端的非编码片段。
5′-UTR从mRNA起点的甲基化鸟嘌呤核苷酸帽延伸至AUG起始密码子,3′-UTR从编码区末端的终止密码子延伸至多聚A尾巴(Poly-A)的末端。

查找基因的启动子区域-NCBI

1. 打开PubMed:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed

 

2. 选择Gene,输入IL17A,点击search,结果如下图,点击第一个:

 

3. 下拉到下图位置,可以看到该基因的以下信息:

 

点击Tools,选择Sequence Text View:

 

还可以看到如下序列信息:

 

4. 以上只是该基因的一些信息,可以用于查找相应的UTR等区域,下面进入正题,寻找promoter区域。还是拉到如下图位置,点击FASTA:

 

5. 基因位置信息如下图:

 

6. 一般认为基因上游2 kb区域为该基因的promoter区域,所以将基因上游2 kb序列调出来:

 

7. 复制上述序列就是基因的启动子序列了。

查找基因的启动子区域-UCSC

1. 打开UCSC:http://www.genome.ucsc.edu/,点击Table Browser:
2. 按照下图所示填好基因相关信息,点击get output:
3.选择genomic:
4. 勾选Promoter/Upstream by选项,并将其改为2000 bases,然后点击get sequence:

5. 得到下面的序列信息,开头直到第一个大写字母前面的所有小写字母序列即为该基因的promoter序列,你可以跟NCBI上得到的序列比对一下,看看是不是一样的呢?

 

6. 当然查找promoter的网站有很多,比如UCSC,在这里就不介绍了,大家可以自行探索,或者加小编微信amateur_1988交流。

 

转录因子结合位点的预测

1. 打开http://jaspar.genereg.net/(我这边这个网址暂时打不开了,所以我登录了这个网址:http://jaspardev.genereg.net/),输入转录因子NFAT,点击Quick Search:

 

2. 将promoter序列粘贴进入右下角的框中,选中左侧转录因子,点击SCAN:

 

3. 得到28条转录因子NFAT与IL17A的结合位点,其中Strand -1没有特殊意义,只需选择Strand 1即可。

 

4. 好了,转录因子与promoter结合位点已经有了,接下来就是愉快的通过实验验证了!Luciferase、点突变、截短、ChIP等统统拉上来就可以了!

 

作者: SciRes

每天分享实验心得,传递最新科研资讯,解读各类专业文献,总结各类科研方法与思路,希望成为给力的科研小助手。微信公众号:SciRes



发表评论

您的电子邮箱地址不会被公开。

评论列表(1)

联系我们

联系我们

(44)07934433023

在线咨询: QQ交谈

邮箱: info@bioengx.org

关注微信
微信扫一扫关注我们

微信扫一扫关注我们

关注微博
返回顶部
Designed by

best down free | web phu nu so | toc dep 2017