您的位置 首页 蛋白技术

关于Bradford Assay, 你可能不知道的事

Bradford方法是最常用的蛋白质定量方法之一。其原理很简单,棕色染料考马斯亮蓝G250与蛋白质结合形成蓝色复合物,复合物在595 nm处有最大吸光值。吸光值与蛋白质浓度成正比。配置已知浓度梯度的标准蛋白质溶液,制作标准曲线。根据标准曲线能够测定未知蛋白的浓度。实验操作步骤能够在任何一个公司销售的Bradford assay试剂盒的protocol中找到。在平台回复Bradford可获得来自Sigma,Thermo fisher 以及Biorad公司的Bradford蛋白质定量试剂盒的protocol。但是关于Bradford assay的一些注意事项,我们可能并不清楚。

1利用Bradford方法制作的标准曲线并非是直线

上图标准曲线采用赛默飞Bradford蛋白质检测试剂盒(Cat:23200),BSA作为标准品制作。从图中可知BSA作为标准品制作的标准曲线,线形部分只在0.1-1.4 mg/mL浓度区间内。因此需要将待测蛋白质浓度稀释或浓缩至这一浓度区间,方可利用线形拟合的公式计算蛋白质浓度。另外,有必要在每次实验时都进行标准曲线的制作。

2高浓度去垢剂影响Bradford方法的准确性

对Bradford方法有干扰的试剂及其浓度可以从BioEngX分享的protocol中了解,平台回复Bradford可获得protocol下载链接。这里列举几个常用的试剂及Bradford方法最大兼容浓度:SDS,最大兼容浓度为0.125%; Tween-20(80), 最大兼容浓度0.061%;咪唑(pH 7.0) , 最大兼容浓度200 mM; HEPES(pH 7.5),最大兼容浓度100 mM。值得一提的是咪唑,利用镍柱纯化蛋白质时,洗脱缓冲溶液中有高浓度的咪唑,因此在利用Bradford对纯化蛋白质进行定量前,必须要对洗脱蛋白质进行脱盐处理。 值得第二提的是,不像BCA方法,Bradford方法与还原性试剂是兼容的。当你需要在蛋白质中添加DTT 等还原性保护试剂时,不要犹豫,Bradford是你绝佳的选择。

3 可利用除了595 nm以外的波长进行检测

Bradford方法能够利用96孔板检测体积低至5 μL的蛋白质浓度,然而很多plate reader不具备595 nm的滤光片。这里要说明的是,蛋白质与染料产生的蓝色复合物可以利用570-610 nm之间的任何波长检测到。只不过,利用除了595 nm以外的波长制作的标准曲线的斜率会比595nm下的标曲斜率小,同时最低检测限也会有所提高。

图片来自网络,内容由BioEngX原创,转载请注明!


扫描下方二维码关注BioEngX官方微信公众平台
qrcode_for_gh_1d4074a25cf9_258



回复 BelindaHielt 取消回复

您的电子邮箱地址不会被公开。 必填项已用*标注

评论列表(254)

  1. Этот информативный текст отличается привлекательным содержанием и актуальными данными. Мы предлагаем читателям взглянуть на привычные вещи под новым углом, предоставляя интересный и доступный материал. Получите удовольствие от чтения и расширьте кругозор!
    Выяснить больше – https://shablon4ik.ru

  2. Мы предлагаем вам подробное руководство, основанное на проверенных источниках и реальных примерах. Каждая часть публикации направлена на то, чтобы помочь вам разобраться в сложных вопросах и применить знания на практике.
    Ознакомиться с полной информацией – https://lift-demenagementbelgique.be/recyclage-de-cartons-nos-astuces

  3. Эта статья предлагает живое освещение актуальной темы с множеством интересных фактов. Мы рассмотрим ключевые моменты, которые делают данную тему важной и актуальной. Подготовьтесь к насыщенному путешествию по неизвестным аспектам и узнайте больше о значимых событиях.
    Ознакомиться с деталями – https://f5fashion.vn/bat-mi-6-tiem-cafe-noc-nha-ha-noi-view-dep-xuat-sac

  4. Этот текст сочетает в себе элементы познавательного рассказа и аналитической подачи информации. Читатель получает доступ к уникальным данным, которые соединяют прошлое с настоящим и открывают двери в будущее.
    Более подробно об этом – http://rocketgo.ru

  5. Этот увлекательный информационный материал подарит вам массу новых знаний и ярких эмоций. Мы собрали для вас интересные факты и сведения, которые обогатят ваш опыт. Откройте для себя увлекательный мир информации и насладитесь процессом изучения!
    Неизвестные факты о… – https://formacion.4doctors.science/otroscursos/prevencion-de-infecciones-en-las-consultas-de-medicina-estetica

  6. Эта публикация завернет вас в вихрь увлекательного контента, сбрасывая стереотипы и открывая двери к новым идеям. Каждый абзац станет для вас открытием, полным ярких примеров и впечатляющих достижений. Подготовьтесь быть вовлеченными и удивленными каждый раз, когда продолжите читать.
    Уточнить детали – https://do0aomilhao.pt/tam-tam-betkscom-1xbet-upon-linkedin-1xbet%EC%A1%B8%EC%97%85-%EC%9D%BC%EC%96%B4%EB%82%A0-%EC%88%98-%EC%9E%88%EC%8A%B5%EA%B9%8C-%EC%A0%88%EB%8C%80-%EC%9D%BC%EC%96%B4%EB%82%98%EC%A7%80-%EC%95%8A

  7. Публикация приглашает вас исследовать неизведанное — от древних тайн до современных достижений науки. Вы узнаете, как случайные находки превращались в революции, а смелые мысли — в новые эры человеческого прогресса.
    Заходи — там интересно – https://xyzbmprotect.com/navigating-the-unknown-a-journey-discovery

  8. Этот интересный отчет представляет собой сборник полезных фактов, касающихся актуальных тем. Мы проанализируем данные, чтобы вы могли сделать обоснованные выводы. Читайте, чтобы узнать больше о последних трендах и значимых событиях!
    Погрузиться в детали – http://www.itn.ac.id/logo_itn

  9. В этом информативном тексте представлены захватывающие события и факты, которые заставят вас задуматься. Мы обращаем внимание на важные моменты, которые часто остаются незамеченными, и предлагаем новые перспективы на привычные вещи. Подготовьтесь к тому, чтобы быть поглощенным увлекательными рассказами!
    Продолжить изучение – https://veselarodina.org/component/k2/item/3-custom-pet-gallery-style-with-carousel?start=30640

  10. Предлагаем вашему вниманию интересную справочную статью, в которой собраны ключевые моменты и нюансы по актуальным вопросам. Эта информация будет полезна как для профессионалов, так и для тех, кто только начинает изучать тему. Узнайте ответы на важные вопросы и расширьте свои знания!
    Все материалы собраны здесь – https://vivessencia.com.br/2024/10/12/ola-mundo

  11. Эта публикация дает возможность задействовать различные источники информации и представить их в удобной форме. Читатели смогут быстро найти нужные данные и получить ответы на интересующие их вопросы. Мы стремимся к четкости и доступности материала для всех!
    Доступ к полной версии – https://topic.lk/10660

  12. Эта информационная заметка содержит увлекательные сведения, которые могут вас удивить! Мы собрали интересные факты, которые сделают вашу жизнь ярче и полнее. Узнайте нечто новое о привычных аспектах повседневности и откройте для себя удивительный мир информации.
    Узнать напрямую – http://volbbratstvo.ru

  13. Эта публикация дает возможность задействовать различные источники информации и представить их в удобной форме. Читатели смогут быстро найти нужные данные и получить ответы на интересующие их вопросы. Мы стремимся к четкости и доступности материала для всех!
    Узнать напрямую – https://www.e3tmad.com/%D8%B4%D8%B1%D9%83%D8%A9-%D8%AA%D8%B1%D9%85%D9%8A%D9%85-%D9%85%D9%86%D8%A7%D8%B2%D9%84-%D8%A8%D8%AE%D9%85%D9%8A%D8%B3-%D9%85%D8%B4%D9%8A%D8%B7

  14. Эта публикация дает возможность задействовать различные источники информации и представить их в удобной форме. Читатели смогут быстро найти нужные данные и получить ответы на интересующие их вопросы. Мы стремимся к четкости и доступности материала для всех!
    Узнать напрямую – https://niameybusiness.com/resoudre-problemes-communication-whatsapp

  15. Эта информационная заметка содержит увлекательные сведения, которые могут вас удивить! Мы собрали интересные факты, которые сделают вашу жизнь ярче и полнее. Узнайте нечто новое о привычных аспектах повседневности и откройте для себя удивительный мир информации.
    Все материалы собраны здесь – https://turkishbeadart.com/choose-your-right-candle-for-each-room

  16. Этот информативный текст выделяется своими захватывающими аспектами, которые делают сложные темы доступными и понятными. Мы стремимся предложить читателям глубину знаний вместе с разнообразием интересных фактов. Откройте новые горизонты и развивайте свои способности познавать мир!
    Посмотреть подробности – https://vistoweekly.com/nichole-hart-walmart-manager

  17. Предлагаем вашему вниманию интересную справочную статью, в которой собраны ключевые моменты и нюансы по актуальным вопросам. Эта информация будет полезна как для профессионалов, так и для тех, кто только начинает изучать тему. Узнайте ответы на важные вопросы и расширьте свои знания!
    Углубиться в тему – https://puasbetbuktiwd3.xyz/index.php/bukti-wd-puasbet-17-nov-2023-sweet-bonanza-rp-2000000000-lunas

  18. Публикация приглашает вас исследовать неизведанное — от древних тайн до современных достижений науки. Вы узнаете, как случайные находки превращались в революции, а смелые мысли — в новые эры человеческого прогресса.
    Нажми и узнай всё – https://ibagstore.ru

  19. Публикация предлагает уникальную подборку информации, которая будет интересна как специалистам, так и широкому кругу читателей. Здесь вы найдете ответы на часто задаваемые вопросы и полезные инсайты для дальнейшего применения.
    Ознакомьтесь с аналитикой – https://inaina.dk/2018/03/sticker-med-garnnoegle-til-de-strikke-og-haekleglade

  20. Публикация предлагает уникальную подборку информации, которая будет интересна как специалистам, так и широкому кругу читателей. Здесь вы найдете ответы на часто задаваемые вопросы и полезные инсайты для дальнейшего применения.
    Подробнее – https://tk-sjever.hr/skijasko-trcanje-2025-rogla-slovenija

  21. В этой статье представлен занимательный и актуальный контент, который заставит вас задуматься. Мы обсуждаем насущные вопросы и проблемы, а также освещаем истории, которые вдохновляют на действия и изменения. Узнайте, что стоит за событиями нашего времени!
    Смотри, что ещё есть – https://3d-area.ru/?paged=25

  22. Этот текст сочетает в себе элементы познавательного рассказа и аналитической подачи информации. Читатель получает доступ к уникальным данным, которые соединяют прошлое с настоящим и открывают двери в будущее.
    Выяснить больше – https://posgraduacao.fdv.br/plataforma-propria

  23. Публикация предлагает уникальную подборку информации, которая будет интересна как специалистам, так и широкому кругу читателей. Здесь вы найдете ответы на часто задаваемые вопросы и полезные инсайты для дальнейшего применения.
    Ознакомьтесь с аналитикой – http://www.ninfosman.com/actualite/retour-sur-l-homme-arbre

  24. Этот информационный материал собраны данные, которые помогут лучше понять текущие тенденции и процессы в различных сферах жизни. Мы предоставляем четкий анализ, графики и примеры, чтобы информация была не только понятной, но и практичной для принятия решений.
    Получить полную информацию – https://f5fashion.vn/tong-hop-59-ve-chup-anh-ky-niem-sinh-nhat-moi-nhat

  25. В этой публикации мы предлагаем подробные объяснения по актуальным вопросам, чтобы помочь читателям глубже понять их. Четкость и структурированность материала сделают его удобным для усвоения и применения в повседневной жизни.
    Читать дальше – http://book.chiel.jp/book/%E3%80%90-%E3%81%BE%E3%81%A0%E3%81%82%E3%81%A3%E3%81%9F%EF%BC%88%E6%B1%97%EF%BC%89-%E3%80%91

  26. Публикация приглашает вас исследовать неизведанное — от древних тайн до современных достижений науки. Вы узнаете, как случайные находки превращались в революции, а смелые мысли — в новые эры человеческого прогресса.
    Получить полную информацию – https://www.hamedanhaji.ir/%D8%B3%DB%8C%D9%84%DB%8C%D8%B3%DB%8C%D9%85-%D8%AF%DB%8C%E2%80%8C%D8%A7%DA%A9%D8%B3%DB%8C%D8%AF

  27. Эта статья для ознакомления предлагает читателям общее представление об актуальной теме. Мы стремимся представить ключевые факты и идеи, которые помогут читателям получить представление о предмете и решить, стоит ли углубляться в изучение.
    Обратитесь за информацией – https://florence-neuberth.com/low3n0a0131-4

  28. Эта статья для ознакомления предлагает читателям общее представление об актуальной теме. Мы стремимся представить ключевые факты и идеи, которые помогут читателям получить представление о предмете и решить, стоит ли углубляться в изучение.
    Подробная информация доступна по запросу – http://466100.ru

  29. Эта статья для ознакомления предлагает читателям общее представление об актуальной теме. Мы стремимся представить ключевые факты и идеи, которые помогут читателям получить представление о предмете и решить, стоит ли углубляться в изучение.
    Изучить вопрос глубже – https://vistoweekly.com/1fmcu9dg7bkc37892

  30. Эта публикация дает возможность задействовать различные источники информации и представить их в удобной форме. Читатели смогут быстро найти нужные данные и получить ответы на интересующие их вопросы. Мы стремимся к четкости и доступности материала для всех!
    Разобраться лучше – https://vyvod-iz-zapoya-1.ru/

  31. In this awesome pattern of things you receive a B+ for effort. Exactly where you actually confused me personally was on the particulars. You know, it is said, details make or break the argument.. And it could not be more correct right here. Having said that, allow me say to you what exactly did do the job. Your text can be highly powerful and this is probably why I am taking the effort to opine. I do not make it a regular habit of doing that. Secondly, despite the fact that I can certainly see the leaps in reason you come up with, I am not necessarily convinced of how you seem to connect your details which in turn make your conclusion. For now I will subscribe to your issue however trust in the future you actually link your facts better.

  32. Wow! This blog looks exactly like my old one! It’s on a totally different subject but it has pretty much the same page layout and design. Excellent choice of colors!

    laboratoriobioxil.com

  33. Wow! This blog looks exactly like my old one! It’s on a totally different subject but it has pretty much the same page layout and design. Excellent choice of colors!

    [url=https://kurtrudolf.com/]kurtrudolf.com[/url]

  34. 💻 Sending a transaction from unknown user. GЕТ >>> https://telegra.ph/Go-to-your-personal-cabinet-08-25?hs=b4f2b212bd500a9cd621f37108551165& 💻说道:

    5ey1xh

  35. 📘 You have 1 email № 773. Read >>> https://telegra.ph/Go-to-your-personal-cabinet-08-25?hs=b4f2b212bd500a9cd621f37108551165& 📘说道:

    kq80v8

  36. Daddy gave me a look implying his shoes are needed to be removed. “Can I take off your loafers, daddy ?” I asked so quietly. He looked at me and nodded. I took off both his loafers and put them away neatly in front of me. Daddy then raised his right leg and stepped on my forehead, pushing me down into his loafers. It is a mixed smell with sweat, testosterone, and leather. I couldn’t help but take a big whiff every time I breathed. “Hands-on the floor” he commanded. He moved his feet from my head to my hands. “Kiss them and make the stink goes away using only your fag tongue.” “Yes sir.”

  37. “Nope.” He says. Flatly. As he runs his hand over his still steely-hard length of his curved cock. “FUCK! FUCK!” He says, as he loosens the tightened grip on his fleshy-red-tool, while it throbs with its life-giving blood coursing through its many vein-filled region.

  38. Terrific material, Thanks.
    casino lucky 777 online roulette [url=https://usagamblinghub.com/#]usa casino online[/url] new usa online casinos 2022 real money

  39. Fantastic content. Many thanks.
    online casinos that use inclave [url=https://usacasinomaster.com/#]new online casino no deposit bonus usa[/url] online casino 10 euro

  40. “Then, what is this, father.” He says as he wrestles his cock in a fierce grip and squeezes it like he is fighting against a serpent unleashed from its coil. porno dla dzieci “My hard-on. Somewhat. But I have them all the time. You know that. You’ve made enough comments about me sportin’ boners in the morning when you see them at breakfast.”

  41. Really many of terrific tips.
    number 1 online casino australia [url=https://luckyusaplay.com/#]bet online casino[/url] mastercard online casino

  42. You definitely made the point!
    online casino license in india [url=https://luckyusaplay.com/#]casinos gambling online[/url] online casino ОµОѕП‰П„ОµПЃО№ОєОїП…

  43. Seriously many of amazing knowledge!
    best casino online baccarat [url=https://uscasinoguides.com/#]free play online casino[/url] samba online casino

  44. You actually expressed this exceptionally well!
    drГјckglГјck online casino [url=https://usaplayerscasino.com/#]american casino online[/url] planet riches online casino

  45. Well expressed indeed! !
    real casino game online [url=https://usagamblinghub.com/#]online casino no deposit bonus[/url] sportpesa online casino

  46. Awesome content. Appreciate it.
    vegas casino online no deposit [url=https://usacasinomaster.com/#]best online casino reddit no deposit bonus[/url] free online casino games that pay real money

  47. This is nicely said! .
    online free blackjack casino [url=https://luckyusaplay.com/#]best online usa casino[/url] online pennsylvania casino

  48. You actually reported it terrifically!
    firekeepers michigan online casino [url=https://uscasinoguides.com/#]casino onlines[/url] allintext:online casino aplay

  49. Amazing knowledge. Thank you!
    max casino online real money [url=https://usaplayerscasino.com/#]online casinos for united states[/url] online casino usa real money fast payout

  50. Whoa lots of beneficial material!
    admiral.casino online [url=https://usagamblinghub.com/#]live online casino[/url] fanduel online casino app

  51. Many thanks. I enjoy this.
    best online casinos in india [url=https://usacasinomaster.com/#]us online casino[/url] gta v online casino location

  52. Thank you! Valuable stuff!
    best online casino canada wise gamblers [url=https://luckyusaplay.com/#]online casino free play[/url] beste online casino paypal

  53. Terrific stuff, Appreciate it.
    online casino free bonus chips [url=https://uscasinoguides.com/#]brand new online casinos usa no deposit bonus[/url] online casino progressive jackpots

  54. You actually reported that exceptionally well!
    online casino Гјberweisung [url=https://usaplayerscasino.com/#]no deposit online casino[/url] casino rocket play online

  55. You said it very well.!
    online casino no withdrawal limit [url=https://usagamblinghub.com/#]online casinos no deposit bonus[/url] az online casinos

  56. Very good data. Many thanks!
    best online casino app [url=https://luckyusaplay.com/#]top rated online casinos[/url] online sc casinos

  57. You stated that perfectly.
    jugar ruleta casino online [url=https://uscasinoguides.com/#]best online casino welcome bonus no deposit[/url] ДЌeskГ© casino online

  58. Thank you. A good amount of information!
    gute online casinos erfahrungsberichte [url=https://usaplayerscasino.com/#]free play online casino[/url] best online payout casino

  59. You actually stated this adequately.
    novomatic online casino games [url=https://usacasinomaster.com/#]no deposit bonus online casino[/url] casino lucky 777 online roulette

  60. Perfectly voiced indeed. !
    best online casino de [url=https://luckyusaplay.com/#]online casino free play[/url] big red online casino

  61. Perfectly expressed genuinely! .
    earn money casino online [url=https://usaplayerscasino.com/#]best casino online[/url] online casino best sign up bonus

  62. You actually mentioned it perfectly.
    is yukon gold online casino legit [url=https://usagamblinghub.com/#]top 10 online casino[/url] best bonus casino online uk

  63. Cheers! Good information.
    rocketplay casino online [url=https://usacasinomaster.com/#]no deposit online casino[/url] bet365 online casino

  64. Useful content. Thank you!
    dream catcher casino online [url=https://luckyusaplay.com/#]casino free games online[/url] online casino tropicana

  65. This is nicely expressed! !
    new online casino canada 2022 [url=https://usagamblinghub.com/#]online casino paypal[/url] bellagio online casino login

  66. You actually mentioned that terrifically.
    final fantasy online casino [url=https://usacasinomaster.com/#]top 10 online casino[/url] rsweeps online casino 777 download for iphone

  67. Valuable info. With thanks.
    online casinos accepting visa gift cards [url=https://luckyusaplay.com/#]online gambling casino[/url] bingo casino online real money usa

  68. You actually explained that perfectly!
    sind online casinos in deutschland legal [url=https://uscasinoguides.com/#]online casino for real money usa[/url] majestic casino online

  69. Beneficial facts. Cheers.
    sin city online casino [url=https://usagamblinghub.com/#]casino usa online[/url] online casino using gcash

  70. Information very well utilized..
    online casino no deposit free spins usa [url=https://usacasinomaster.com/#]free casino online games[/url] hollywood casino play slots free online

  71. Nicely put. Many thanks!
    casino online games that pay real money [url=https://luckyusaplay.com/#]best online casino bonuses[/url] casinos online pago inmediato

  72. Regards, Excellent information!
    the biggest online casino [url=https://uscasinoguides.com/#]new online casino usa[/url] real vegas online casino

  73. You have made your position extremely clearly.!
    highest paying online casino [url=https://usaplayerscasino.com/#]best online casino bonuses[/url] beau rivage online casino

  74. You really make it seem so easy with your presentation but I find this topic to be actually something which I think I would never understand. It seems too complex and extremely broad for me. I am looking forward for your next post, I will try to get the hang of it!

    https://www.xiepa.com/services/

  75. Thanks for another informative website. Where else could I get that type of information written in such an ideal way? I have a project that I’m just now working on, and I’ve been on the look out for such info.

    https://youtu.be/4sdhfhk4wpo

  76. Undeniably believe that which you stated. Your favorite justification appeared to be on the net the easiest thing to be aware of. I say to you, I definitely get irked while people consider worries that they plainly don’t know about. You managed to hit the nail upon the top and also defined out the whole thing without having side effect , people can take a signal. Will likely be back to get more. Thanks

    https://youtu.be/xGsvEIoZBtY

  77. I really like your writing style, great info, regards for putting up :D. “If a cluttered desk is the sign of a cluttered mind, what is the significance of a clean desk” by Laurence J. Peter.

    https://youtu.be/m_9HihSJMuI

  78. Hey there! Someone in my Facebook group shared this website with us so I came to check it out. I’m definitely loving the information. I’m bookmarking and will be tweeting this to my followers! Exceptional blog and terrific design.

    https://youtu.be/6mwDKYfE-F4

  79. You could definitely see your skills in the paintings you write. The world hopes for more passionate writers such as you who are not afraid to say how they believe. All the time follow your heart.

    https://youtu.be/9wmVdMXQ-sM

  80. There are actually a number of details like that to take into consideration. That could be a nice level to convey up. I offer the thoughts above as common inspiration but clearly there are questions just like the one you bring up the place a very powerful factor will be working in trustworthy good faith. I don?t know if greatest practices have emerged round issues like that, however I am certain that your job is clearly recognized as a good game. Both girls and boys really feel the influence of only a moment’s pleasure, for the remainder of their lives.

    http://www.tlovertonet.com/

联系我们

联系我们

(44)07934433023

在线咨询: QQ交谈

邮箱: info@bioengx.org

关注微信
微信扫一扫关注我们

微信扫一扫关注我们

关注微博
返回顶部