您的位置 首页 科研经验

干货—技能篇之分子生物学常用小软件分享

发布: 2018-12-22 1,987阅读 221评论

作者：唐琦

哈喽，小编又来了，继上周的干货篇【请戳右边：干货 | 实验篇之RT-PCR 】，我们继续给大家分享有利于科研的干货。这次来说说科研工作中常用的小软件~，希望帮助大家了解并运用这些软件，辅助科研工作达到事半功倍的效果。那么就随小编一起来看一看~

分子克隆相关

1. PCR 引物设计-Primer Primer

Primer Premier 是一款由加拿大的 Premier 公司开发的专业用于 PCR 或测序引物以及杂交探针的设计、评估的软件。其主要界面是分为序列编辑窗口（Genetank），引物设计窗口（Primer Design），酶切分析窗口（Restriction Sites）和 Motif 分析窗口。

图1 primer-design

Primer Premier 软件的主要功能分四种：引物设计、限制性内切酶位点分析、DNA 基元（motif）查找和同源性分析功能。此外，该软件还有一些特殊功能：简并引物设计，序列”朗读”、DNA 与蛋白序列的互换、语音提示键盘输入等等。

目前最常用的版本是 Primer Primer5.0，新版已更新到6.24且更加智能。其实小编也只是用过比较常规的模板，比如常规 PCR 引物设计。更多的功能还希望同学们多多留言与我一起分享心得。

在这里推荐几个常用的引物设计网站：
① Primer3/Primer3Plus — 使用广泛、操作简单
http://bioinfo.ut.ee/primer3/
② Primer-BLAST — NCBI 的引物设计和特异性检验工具
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/
用于在线设计聚合酶链反应（PCR）的特异性寡核苷酸引物，这个工具同时兼具了Primer3 和 NCBI 的 Blast 功能。
③ GeneFisher — 简并引物的设计工具
http://bibiserv.techfak.uni-bielefeld.de/genefisher2/

引物设计的注意事项
① 引物的长度一般为15-30 bp，最好在18~24 bp，因为太短易形成错配(False priming) 降低特异性，而太长也会降低特异性，并且降低产量。
② 引物在模板内最好具有单一性，也就是说在模板内部没有错配。特别是3’端，一定要避免连续4个以上的碱基互补错配。
③ 引物序列的 GC 含量最好在40％一60％，且上下游引物序列 GC 含量的差异不要太大，3’端最后5个碱基最好不要富含 GC，特别是连续3个的 G 或 C。
④ 引物所在的模板区域应该位于外显子区，最好跨越一个内含子区，这样便于对扩增出来的片段进行功能鉴定和表型分析。
⑤ 如果以 DNA 为模板设计引物，产物长度在100—600 bp 比较理想。而以 mRNA 为模板设计引物时，产物长度在150—300 bp 比较理想。
⑥ 5’ 端对 PCR 影响不太大，可以引进修饰位点和标记物。

2. 质粒图谱查询 — Vector NTI

Vector NTI Advance 11.5 是目前整合度最高，使用的最高的多功能桌面序列分析软件包，包含了一整套数据分析和管理的工具。可以查看质粒图谱查看和编辑、序列比对等。

图2 Vector NTI Advance

和 Primer Premier 5 一样，是很多的分子生物学实验室的标配。Vector NTI 最新的版本11.5是2010年发布，更多版本的请参照右边链接https://www.thermofisher.com/cn/zh/home/life-science/cloning/vector-nti-software.html

3. 质粒图谱查询 — Snapgene

Snapgene 可以做质粒图谱、直观的查找酶切位点、标记基因片段属性、直观查看引物所在位置，查看开放阅读框所编码氨基酸，还可以进行多序列比对、自动引物设计、支持 Gibson Assembly、直接导入 Genbank 序列号等。当然正版软件价格也很贵，单一授权$350/年，或$750/永久。详情可登录官网进行查询：http://www.snapgene.com/products/snapgene/about_snapgene/

图3 融合克隆模拟–质粒图谱分析

Snapgene 功能十分强大，比如可以用来模拟建立克隆，这使得我们设计建立克隆方案更加简便，如果克隆过程设计方案有缺陷，我们可以借助模拟发现并做出纠正。 Snapgene 可以模拟的标准限制性克隆，也可以模拟融合克隆。上图就是在 product 选项卡点击 Choose Overlapping PCR Primers，即可设计好引物，形成融合后的质粒图谱。

4. 蛋白相关

与核酸序列一样，蛋白质序列的检索往往是进行相关分析的第一步，由于数据库和网络技校术的发展，蛋白序列的检索是十分方便，将蛋白质序列数据库下载到本地检索和通过国际互联网进行检索均是可行的。
① 由 NCBI 检索蛋白质序列
http://www.ncbi.nlm.nih.gov:80/entrz/query.fcgi?db=protein
② 利用 SRS 系统从 EMBL 检索蛋白质序列
http://srs.ebi.ac.uk，可利用 EMBL 的 SRS 系统进行蛋白质序列的检索。
③ 蛋白质功能预测
基于 NCBI/BLAST 软件的蛋白序列同源性分析类似于核酸序列同源性分析，可以直接将待分析的蛋白质序列输入 NCBI/BLAST （www.ncbi.nlm.gov/blast），选择程序 BLASTP 进行分析。

5. 数据分析 – Origin

Origin，也有小伙伴叫它橙子，是由 OriginLab 公司开发的一个科学绘图、数据分析软件，只支持在 Microsoft Windows下运行，支持各种各样的 2D/3D 图形。Origin 中的数据分析功能包括统计，信号处理，曲线拟合以及峰值分析；支持多种格式的数据，包括 ASCII、Excel、DIADem、NetCDF、SPC 等等。曲线拟合是采用基于 Levernberg-Marquardt 算法（LMA）的非线性最小二乘法拟合。翻译过来就是操作简单，页面简洁，适合初学者使用。

图4 Origin

不过，因为 Origin 的专案档（.pro）是封闭格式，并且只支援 Windows 这个操作系统，是其较大的缺点。因此网络上也有不少免费及开源或自由软件实作出类似功能的软件。其中以 LabPlot（基于 KDE 函式库）以及 QtiPlot（基于 QT 开发的）为较为知名的同类软件，因此在实验室数据分析方面的工作，小伙伴也可以考虑这两套软件。

文献管理

1. EndNote

这是一个专门用于管理参考文献数据库的软件，可以作为插件适用于 Office，WPS。并自动根据文献的先后顺序编号，按照指定的格式将文献附在文章的最后。如果在文章中间插入了引用的新文献，软件会自动更新编号，并将引用的文献插入到文章最后参考文献中合适的位置。

图5 EndNote

2. ReadCube

ReadCube 是以文献阅读为中心的文献管理软件，区别于 EndNote 以引文为核心的管理软件。不仅能够自动识别 PDF 文档中的信息，比如题目、作者、摘要、引文，尤其对于生命科学的文献非常准确。它可以根据你的文献数据库，推荐和你研究兴趣最相关的文献。可以找到全文下载的连接，还可以通过大学图书馆的代理访问全文数据库。ReadCube 和 Nature 有合作，大家读 Nature 论文的时候都能看到。

图6 ReadCube

实验记录

Microsoft OneNote 是老牌笔记类软件，在如今百花齐放的笔记类市场仍然有众多死忠粉的拥护。近年推出的 Notion 也还不错，但仍然无法取代 OneNote 在笔记体系中的核心地位。

图7 Microsoft OneNote

软件优势

① 免费：OneNote 属于 Microsoft Office 套件之一，但 OneNote 已经从 Office 里面单独免费出来。
② 强大的编辑功能：OneNote 的编辑功能不仅非常强大，而且和其它Office 套件一脉相承，这也意味着它非常容易上手，轻度用户几乎不需要学习成本。
③ 层次分明的笔记本系统：OneNote 的系统很像一本书，书中有章，章下有节，节下有页。在「笔记本」下可建立：「分区组- 分区- 页- 子页」。分区组中还可以建立分区组，算是有无限层级了。这种树状结构很适合知识管理，逻辑层次清晰、友好。

当然，OneNote 很棒，但还有其他的一些软件，比如国产的很多云笔记，大家也可以尝试。

最后，这一期的分享就暂时告一段落了，如果有任何问题欢迎随时在文章下方留言，或发送邮件至 enzyme@novogene.com 邮箱进行咨询。

酶试剂研究部 唐 琦丨文案
孙津津丨编辑
图片来源于网络，侵删

1.30K赞
标签:



相关文章

回复 Ajddyt 取消回复

您的电子邮箱地址不会被公开。 必填项已用*标注

评论列表(221)

  2. В этом информативном обзоре собраны самые интересные статистические данные и факты, которые помогут лучше понять текущие тренды. Мы представим вам цифры и графики, которые иллюстрируют, как развиваются различные сферы жизни. Эта информация станет отличной основой для глубокого анализа и принятия обоснованных решений.
    Исследовать вопрос подробнее – https://quick-vyvod-iz-zapoya-1.ru/

    回复

  3. В этой статье вы найдете познавательную и занимательную информацию, которая поможет вам лучше понять мир вокруг. Мы собрали интересные данные, которые вдохновляют на размышления и побуждают к действиям. Открывайте новую информацию и получайте удовольствие от чтения!
    Получить дополнительную информацию – https://quick-vyvod-iz-zapoya-1.ru/

    回复

  4. Публикация приглашает вас исследовать неизведанное — от древних тайн до современных достижений науки. Вы узнаете, как случайные находки превращались в революции, а смелые мысли — в новые эры человеческого прогресса.
    Только для своих – https://itexamsolutions.net/question/refer-to-the-exhibit-what-step-resolves-the-authentication-issue

    回复

  5. Мы предлагаем вам подробное руководство, основанное на проверенных источниках и реальных примерах. Каждая часть публикации направлена на то, чтобы помочь вам разобраться в сложных вопросах и применить знания на практике.
    Ознакомьтесь с аналитикой – http://www.tygmeh.ru

    回复

  6. Мы собрали для вас самые захватывающие факты из мира науки и истории. От малознакомых деталей до грандиозных событий — эта статья расширит ваш кругозор и подарит новое понимание того, как устроен наш мир.
    Это стоит прочитать полностью – https://www.thaimisdelicias.net/product/stir-fry-pearl-noodles

    回复

  7. Этот текст призван помочь читателю расширить кругозор и получить практические знания. Мы используем простой язык, наглядные примеры и структурированное изложение, чтобы сделать обучение максимально эффективным и увлекательным.
    Более подробно об этом – https://f5fashion.vn/tong-hop-voi-hon-60-ve-hinh-nen-thuyen-va-bien-hay-nhat

    回复

  8. Этот текст сочетает в себе элементы познавательного рассказа и аналитической подачи информации. Читатель получает доступ к уникальным данным, которые соединяют прошлое с настоящим и открывают двери в будущее.
    Почему это важно? – http://www.swkatarzynazgierz.pl/cropped-archidiecezja-lodzka-logo-2-png

    回复

  9. Публикация приглашает вас исследовать неизведанное — от древних тайн до современных достижений науки. Вы узнаете, как случайные находки превращались в революции, а смелые мысли — в новые эры человеческого прогресса.
    Только для своих – https://www.res.cmb.ac.lk/humanities.education/c.hathlahawaththa/index.php/pubs/reproductive-health-of-katunayake-ftz-migrant-female-workers

    回复

  10. В этой статье вы найдете познавательную и занимательную информацию, которая поможет вам лучше понять мир вокруг. Мы собрали интересные данные, которые вдохновляют на размышления и побуждают к действиям. Открывайте новую информацию и получайте удовольствие от чтения!
    Смотрите также – https://f5fashion.vn/update-yong-saccone-obituary-and-death-cause-american-educator

    回复

  11. Публикация приглашает вас исследовать неизведанное — от древних тайн до современных достижений науки. Вы узнаете, как случайные находки превращались в революции, а смелые мысли — в новые эры человеческого прогресса.
    Обратитесь за информацией – https://zoesameth.com/confidence

    回复

  12. В этой информационной статье вы найдете интересное содержание, которое поможет вам расширить свои знания. Мы предлагаем увлекательный подход и уникальные взгляды на обсуждаемые темы, побуждая пользователей к активному мышлению и критическому анализу.
    Узнай первым! – https://789winve.com/da-ga-thomo

    回复

  13. Публикация приглашает вас исследовать неизведанное — от древних тайн до современных достижений науки. Вы узнаете, как случайные находки превращались в революции, а смелые мысли — в новые эры человеческого прогресса.
    Нажмите, чтобы узнать больше – https://orientretie.be/best-dessert-for-your-body-and-mind-try-it

    回复

  14. Публикация приглашает вас исследовать неизведанное — от древних тайн до современных достижений науки. Вы узнаете, как случайные находки превращались в революции, а смелые мысли — в новые эры человеческого прогресса.
    Что ещё? Расскажи всё! – https://www.orcaretirement.com/retirement-home/glynnwood-retirement-residence

    回复

  15. Эта статья предлагает живое освещение актуальной темы с множеством интересных фактов. Мы рассмотрим ключевые моменты, которые делают данную тему важной и актуальной. Подготовьтесь к насыщенному путешествию по неизвестным аспектам и узнайте больше о значимых событиях.
    Нажми и узнай всё – https://www.ffmadvogados.com.br/o-milagre-da-contribuicao-unica

    回复

  16. Эта статья для ознакомления предлагает читателям общее представление об актуальной теме. Мы стремимся представить ключевые факты и идеи, которые помогут читателям получить представление о предмете и решить, стоит ли углубляться в изучение.
    Изучить вопрос глубже – http://faustart.ru

    回复

  17. Публикация приглашает вас исследовать неизведанное — от древних тайн до современных достижений науки. Вы узнаете, как случайные находки превращались в революции, а смелые мысли — в новые эры человеческого прогресса.
    Почему это важно? – https://canadianpardonoffices.ca/2016/01/12/hello-world

    回复

  18. Этот информативный текст выделяется своими захватывающими аспектами, которые делают сложные темы доступными и понятными. Мы стремимся предложить читателям глубину знаний вместе с разнообразием интересных фактов. Откройте новые горизонты и развивайте свои способности познавать мир!
    Лучшее решение — прямо здесь – https://synclik.com/index.php/content-writing

    回复

  19. Этот интересный отчет представляет собой сборник полезных фактов, касающихся актуальных тем. Мы проанализируем данные, чтобы вы могли сделать обоснованные выводы. Читайте, чтобы узнать больше о последних трендах и значимых событиях!
    Погрузиться в детали – https://neowinnbiotech.com/empowering-peopleto-improve-their-lives-acadia-hospital

    回复

  20. Этот информационный материал собраны данные, которые помогут лучше понять текущие тенденции и процессы в различных сферах жизни. Мы предоставляем четкий анализ, графики и примеры, чтобы информация была не только понятной, но и практичной для принятия решений.
    Детальнее – https://altsm.ru

    回复

  21. Эта статья для ознакомления предлагает читателям общее представление об актуальной теме. Мы стремимся представить ключевые факты и идеи, которые помогут читателям получить представление о предмете и решить, стоит ли углубляться в изучение.
    Изучить аспект более тщательно – https://f5fashion.vn/khoa-hoc-he-lo-bi-mat-ve-con-cat-di-thuong-o-sa-mac

    回复

  22. Эта обзорная заметка содержит ключевые моменты и факты по актуальным вопросам. Она поможет читателям быстро ориентироваться в теме и узнать о самых важных аспектах сегодня. Получите краткий курс по современной информации и оставайтесь в курсе событий!
    Выяснить больше – https://f5fashion.vn/chau-kiet-luan-to-chuc-le-cuoi-tung-bung-khap-the-gioi

    回复

  23. Предлагаем вашему вниманию интересную справочную статью, в которой собраны ключевые моменты и нюансы по актуальным вопросам. Эта информация будет полезна как для профессионалов, так и для тех, кто только начинает изучать тему. Узнайте ответы на важные вопросы и расширьте свои знания!
    Изучить вопрос глубже – https://f5fashion.vn/hot-bronny-james-cardiac-arrest-video-heart-attack

    回复

  24. Эта публикация завернет вас в вихрь увлекательного контента, сбрасывая стереотипы и открывая двери к новым идеям. Каждый абзац станет для вас открытием, полным ярких примеров и впечатляющих достижений. Подготовьтесь быть вовлеченными и удивленными каждый раз, когда продолжите читать.
    Осуществить глубокий анализ – https://cpibrasil.com/hello-world

    回复

  25. Публикация приглашает вас исследовать неизведанное — от древних тайн до современных достижений науки. Вы узнаете, как случайные находки превращались в революции, а смелые мысли — в новые эры человеческого прогресса.
    Ознакомьтесь с аналитикой – https://www.10beste.com/beste-budget-hotel-amsterdam

    回复

  26. Этот информационный материал собраны данные, которые помогут лучше понять текущие тенденции и процессы в различных сферах жизни. Мы предоставляем четкий анализ, графики и примеры, чтобы информация была не только понятной, но и практичной для принятия решений.
    Заходи — там интересно – https://www.od-bau-gmbh.de/blog_single_layout_overlay

    回复

  27. Этот информационный обзор станет отличным путеводителем по актуальным темам, объединяющим важные факты и мнения экспертов. Мы исследуем ключевые идеи и представляем их в доступной форме для более глубокого понимания. Читайте, чтобы оставаться в курсе событий!
    Обратитесь за информацией – http://deti-sarov.ru

    回复

  28. Этот информативный текст выделяется своими захватывающими аспектами, которые делают сложные темы доступными и понятными. Мы стремимся предложить читателям глубину знаний вместе с разнообразием интересных фактов. Откройте новые горизонты и развивайте свои способности познавать мир!
    Неизвестные факты о… – http://reklamaorenairport.ru

    回复

  29. Эта статья для ознакомления предлагает читателям общее представление об актуальной теме. Мы стремимся представить ключевые факты и идеи, которые помогут читателям получить представление о предмете и решить, стоит ли углубляться в изучение.
    Все материалы собраны здесь – http://www.z-alive.ru

    回复

  30. Этот информативный текст отличается привлекательным содержанием и актуальными данными. Мы предлагаем читателям взглянуть на привычные вещи под новым углом, предоставляя интересный и доступный материал. Получите удовольствие от чтения и расширьте кругозор!
    Как достичь результата? – https://www.badmintonclubtotes.fr/2024/08/26/forum-des-associations-5

    回复

  31. Выбор помощи на дому имеет ряд значительных преимуществ:
    Исследовать вопрос подробнее – [url=https://vyvod-iz-zapoya-tula0.ru/]вывод из запоя недорого[/url]

    回复

  32. Этот информационный обзор станет отличным путеводителем по актуальным темам, объединяющим важные факты и мнения экспертов. Мы исследуем ключевые идеи и представляем их в доступной форме для более глубокого понимания. Читайте, чтобы оставаться в курсе событий!
    Это стоит прочитать полностью – http://ladogakrai.ru

    回复

  33. Этот текст призван помочь читателю расширить кругозор и получить практические знания. Мы используем простой язык, наглядные примеры и структурированное изложение, чтобы сделать обучение максимально эффективным и увлекательным.
    Открыть полностью – https://mardomegolestan.ir/%D8%A7%D8%B9%D9%84%D8%A7%D9%85-%D8%B4%D9%87%D8%B1%D9%87%D8%A7%DB%8C-%D9%85%D9%85%D9%86%D9%88%D8%B9%D9%87-%D9%88%D8%B1%D9%88%D8%AF-%D8%A8%D9%87-%D8%A7%D8%B3%D8%AA%D8%A7%D9%86%D9%87

    回复

  34. Этот текст призван помочь читателю расширить кругозор и получить практические знания. Мы используем простой язык, наглядные примеры и структурированное изложение, чтобы сделать обучение максимально эффективным и увлекательным.
    Нажмите, чтобы узнать больше – https://topic.lk/6199

    回复

  35. В этой публикации мы предлагаем подробные объяснения по актуальным вопросам, чтобы помочь читателям глубже понять их. Четкость и структурированность материала сделают его удобным для усвоения и применения в повседневной жизни.
    Неизвестные факты о… – http://poisk.cerkov.ru/catalog/group/90

    回复

  36. Этот информационный обзор станет отличным путеводителем по актуальным темам, объединяющим важные факты и мнения экспертов. Мы исследуем ключевые идеи и представляем их в доступной форме для более глубокого понимания. Читайте, чтобы оставаться в курсе событий!
    Подробнее можно узнать тут – https://www.antonelloosteria.com/menu-category/brunches

    回复

  37. В этом обзорном материале представлены увлекательные детали, которые находят отражение в различных аспектах жизни. Мы исследуем непонятные и интересные моменты, позволяя читателю увидеть картину целиком. Погрузитесь в мир знаний и удивительных открытий!
    Полная информация здесь – https://diamondrvpark.com/hello-world

    回复

  38. Этот текст сочетает в себе элементы познавательного рассказа и аналитической подачи информации. Читатель получает доступ к уникальным данным, которые соединяют прошлое с настоящим и открывают двери в будущее.
    Более подробно об этом – https://computacao.pucpcaldas.br/imagem8_feira

    回复

  39. Эта информационная заметка содержит увлекательные сведения, которые могут вас удивить! Мы собрали интересные факты, которые сделают вашу жизнь ярче и полнее. Узнайте нечто новое о привычных аспектах повседневности и откройте для себя удивительный мир информации.
    Изучить аспект более тщательно – https://arkaychilledfoods.co.uk/what-your-customers-think-about-you

    回复

  40. Эта обзорная заметка содержит ключевые моменты и факты по актуальным вопросам. Она поможет читателям быстро ориентироваться в теме и узнать о самых важных аспектах сегодня. Получите краткий курс по современной информации и оставайтесь в курсе событий!
    Исследовать вопрос подробнее – https://vistoweekly.com/g15tools-com

    回复

  41. Этот текст призван помочь читателю расширить кругозор и получить практические знания. Мы используем простой язык, наглядные примеры и структурированное изложение, чтобы сделать обучение максимально эффективным и увлекательным.
    Что ещё? Расскажи всё! – http://abilit.ru

    回复

  42. Этот информативный текст выделяется своими захватывающими аспектами, которые делают сложные темы доступными и понятными. Мы стремимся предложить читателям глубину знаний вместе с разнообразием интересных фактов. Откройте новые горизонты и развивайте свои способности познавать мир!
    Разобраться лучше – https://www.cassiaresorts.com/product/deluxe-suite

    回复

  43. Эта познавательная публикация погружает вас в море интересного контента, который быстро захватит ваше внимание. Мы рассмотрим важные аспекты темы и предоставим вам уникальныеInsights и полезные сведения для дальнейшего изучения.
    Узнать больше – https://www.mainbrewcoffee.com/mbc-logo-2x

    回复

  44. Эта информационная заметка содержит увлекательные сведения, которые могут вас удивить! Мы собрали интересные факты, которые сделают вашу жизнь ярче и полнее. Узнайте нечто новое о привычных аспектах повседневности и откройте для себя удивительный мир информации.
    Изучить аспект более тщательно – https://tensyokuejentotonomenndanndezettainiyattehaikenaikoto.com

    回复

  45. Этот текст сочетает в себе элементы познавательного рассказа и аналитической подачи информации. Читатель получает доступ к уникальным данным, которые соединяют прошлое с настоящим и открывают двери в будущее.
    Ознакомьтесь с аналитикой – https://accademiapedagogiaviva.com/eventi-apv/residenziale-valtellina

    回复

  46. В этом информативном обзоре собраны самые интересные статистические данные и факты, которые помогут лучше понять текущие тренды. Мы представим вам цифры и графики, которые иллюстрируют, как развиваются различные сферы жизни. Эта информация станет отличной основой для глубокого анализа и принятия обоснованных решений.
    Детальнее – https://www.hindufestivalsonline.com/7-reasons-to-participate-in-aadi-perukku

    回复

  47. Публикация приглашает вас исследовать неизведанное — от древних тайн до современных достижений науки. Вы узнаете, как случайные находки превращались в революции, а смелые мысли — в новые эры человеческого прогресса.
    Все материалы собраны здесь – https://paulusgemeinde-raunheim.de/?p=1

    回复

  48. Публикация приглашает вас исследовать неизведанное — от древних тайн до современных достижений науки. Вы узнаете, как случайные находки превращались в революции, а смелые мысли — в новые эры человеческого прогресса.
    Только для своих – http://www.khaski-iz-skazki.ru

    回复

  49. Этот информативный текст выделяется своими захватывающими аспектами, которые делают сложные темы доступными и понятными. Мы стремимся предложить читателям глубину знаний вместе с разнообразием интересных фактов. Откройте новые горизонты и развивайте свои способности познавать мир!
    Ссылка на источник – https://www.transmadura.com/2017/10/13/sadis-membacok-orang-tak-bersalah

    回复

  50. Этот информативный текст отличается привлекательным содержанием и актуальными данными. Мы предлагаем читателям взглянуть на привычные вещи под новым углом, предоставляя интересный и доступный материал. Получите удовольствие от чтения и расширьте кругозор!
    Доступ к полной версии – https://alumex-steklo.ru

    回复

  51. Эта информационная заметка содержит увлекательные сведения, которые могут вас удивить! Мы собрали интересные факты, которые сделают вашу жизнь ярче и полнее. Узнайте нечто новое о привычных аспектах повседневности и откройте для себя удивительный мир информации.
    Все материалы собраны здесь – https://linkanews.com/the-importance-of-seo-unlocking-online-success

    回复

  52. Эта информационная заметка содержит увлекательные сведения, которые могут вас удивить! Мы собрали интересные факты, которые сделают вашу жизнь ярче и полнее. Узнайте нечто новое о привычных аспектах повседневности и откройте для себя удивительный мир информации.
    Смотри, что ещё есть – http://www.11dle.ru

    回复

  53. В этом обзорном материале представлены увлекательные детали, которые находят отражение в различных аспектах жизни. Мы исследуем непонятные и интересные моменты, позволяя читателю увидеть картину целиком. Погрузитесь в мир знаний и удивительных открытий!
    Подробнее тут – https://shop.platinumwellness.net/hello-world

    回复

  54. Этот увлекательный информационный материал подарит вам массу новых знаний и ярких эмоций. Мы собрали для вас интересные факты и сведения, которые обогатят ваш опыт. Откройте для себя увлекательный мир информации и насладитесь процессом изучения!
    Ознакомиться с полной информацией – https://baothamnhung.com/doc-ket-luan-dieu-tra-vu-van-thinh-phat-chet-va-hoa-giai-trach-nhiem-phan-2

    回复

  55. Эта обзорная заметка содержит ключевые моменты и факты по актуальным вопросам. Она поможет читателям быстро ориентироваться в теме и узнать о самых важных аспектах сегодня. Получите краткий курс по современной информации и оставайтесь в курсе событий!
    Перейти к статье – https://f5fashion.vn/zach-johnson-net-worth-in-2023-how-rich-is-he-now-update

    回复

  56. Мы собрали для вас самые захватывающие факты из мира науки и истории. От малознакомых деталей до грандиозных событий — эта статья расширит ваш кругозор и подарит новое понимание того, как устроен наш мир.
    Секреты успеха внутри – https://a1classictravels.com/blog/top-20-interesting-facts-about-hawa-mahal-in-jaipur-rajasthan

    回复

  57. Эта информационная заметка содержит увлекательные сведения, которые могут вас удивить! Мы собрали интересные факты, которые сделают вашу жизнь ярче и полнее. Узнайте нечто новое о привычных аспектах повседневности и откройте для себя удивительный мир информации.
    Получить исчерпывающие сведения – https://cannex.ai/harnessing-the-power-of-social-media-for-business-growth

    回复

  58. Предлагаем вашему вниманию интересную справочную статью, в которой собраны ключевые моменты и нюансы по актуальным вопросам. Эта информация будет полезна как для профессионалов, так и для тех, кто только начинает изучать тему. Узнайте ответы на важные вопросы и расширьте свои знания!
    Информация доступна здесь – https://futuresima.com/2024/02/14/hello-world

    回复

  59. В этом обзорном материале представлены увлекательные детали, которые находят отражение в различных аспектах жизни. Мы исследуем непонятные и интересные моменты, позволяя читателю увидеть картину целиком. Погрузитесь в мир знаний и удивительных открытий!
    Не упусти важное! – https://www.unlockedbrasil.com/1xbet-%D0%BF%D0%BE%D0%BB%D0%BD%D0%B0%D1%8F-%D1%80%D1%83%D0%BA%D0%BE%D0%B2%D0%BE%D0%B4%D1%81%D1%82%D0%B2%D0%BE-%D0%B4%D0%BB%D1%8F-%D0%BD%D0%B0%D1%87%D0%B8%D0%BD%D0%B0%D1%8E%D1%89%D0%B8%D1%85-%D0%B8

    回复

  60. В этой статье представлен занимательный и актуальный контент, который заставит вас задуматься. Мы обсуждаем насущные вопросы и проблемы, а также освещаем истории, которые вдохновляют на действия и изменения. Узнайте, что стоит за событиями нашего времени!
    Подробная информация доступна по запросу – https://pureword.cibunet.com/cibuvideo/aralen-for-sale

    回复

  61. Мы собрали для вас самые захватывающие факты из мира науки и истории. От малознакомых деталей до грандиозных событий — эта статья расширит ваш кругозор и подарит новое понимание того, как устроен наш мир.
    Узнать из первых рук – http://320volt.ru

    回复

  62. Предлагаем вашему вниманию интересную справочную статью, в которой собраны ключевые моменты и нюансы по актуальным вопросам. Эта информация будет полезна как для профессионалов, так и для тех, кто только начинает изучать тему. Узнайте ответы на важные вопросы и расширьте свои знания!
    Все материалы собраны здесь – https://www.hotel-sugano.com/bbs/sugano.cgi/www.skitour.su/sinopipefittings.com/e_Feedback/www.skitour.su/sinopipefittings.com/e_Feedback/sugano.cgi?page0=val

    回复

  63. Этот информативный текст отличается привлекательным содержанием и актуальными данными. Мы предлагаем читателям взглянуть на привычные вещи под новым углом, предоставляя интересный и доступный материал. Получите удовольствие от чтения и расширьте кругозор!
    Практические советы ждут тебя – https://f5fashion.vn/son-gai-oc-voi-18-mon-kinh-di-tu-con-trung

    回复

  64. Эта статья предлагает живое освещение актуальной темы с множеством интересных фактов. Мы рассмотрим ключевые моменты, которые делают данную тему важной и актуальной. Подготовьтесь к насыщенному путешествию по неизвестным аспектам и узнайте больше о значимых событиях.
    Детальнее – https://vistoweekly.com/american-musican-and-dramatic-academy-ash-straw

    回复

  65. Эта познавательная публикация погружает вас в море интересного контента, который быстро захватит ваше внимание. Мы рассмотрим важные аспекты темы и предоставим вам уникальныеInsights и полезные сведения для дальнейшего изучения.
    Получить дополнительную информацию – https://vyvod-iz-zapoya-1.ru/

    回复

  66. В данной обзорной статье представлены интригующие факты, которые не оставят вас равнодушными. Мы критикуем и анализируем события, которые изменили наше восприятие мира. Узнайте, что стоит за новыми открытиями и как они могут изменить ваше восприятие реальности.
    Изучить вопрос глубже – https://vyvod-iz-zapoya-1.ru/

    回复

  72. Hey! Do you know if they make any plugins to protect against hackers? I’m kinda paranoid about losing everything I’ve worked hard on. Any recommendations?

    回复

  74. Your style is so unique compared to other folks I have read stuff from. I appreciate you for posting when you’ve got the opportunity, Guess I’ll just bookmark this blog.

    回复

  78. I have to thank you for the efforts you have put in penning this blog. I really hope to view the same high-grade content by you later on as well. In truth, your creative writing abilities has encouraged me to get my own website now 😉

    [url=https://tilakcollegeofeducation.edu.in/fun88-app-indepth-qa-expert-betting-insights/]tilakcollegeofeducation.edu.in[/url]

    回复

  105. Garrett picks up the pee-stained and cum-leaked jock from the tile floor.

    回复

  110. Garrett can see what his father is doing, unconsciously his hands moves to his cock. He strokes the length of his tool with his left hand while he teases the blistering red crown with the fingertips of his right hand. The lightning of his cool fingertips sends sparks through every nerve in his body. The now lukewarm water streams through the curls of his hair rinsing away the last vestiges of the soapy lather. It all goes down the drain in a swirl of bubbles.

    回复

  111. Thank you. I enjoy it!
    mohegan casino pa online [url=https://usacasinomaster.com/#]best paying online casino[/url] gta 5 online dlc casino

    回复

  112. Position certainly utilized..
    online casino in [url=https://luckyusaplay.com/#]online casino free spins[/url] fast payout usa online casino

    回复

  113. His son bucks on the lid as he turns beet red from his carnal machinations. [url=https://arturzasada.pl/]gej porno[/url] I used my teeth to strip off daddy’s black sheer socks. I placed them in my mouth and washed them with my saliva. I swallowed every single sweat and stink from these socks. It takes so well. I rolled them into a ball and stuck them into my jockstrap where my small dick and balls were.

    回复

  115. Thanks a lot! A lot of stuff.
    online casino bingo games [url=https://usaplayerscasino.com/#]legit online casinos[/url] grand theft auto online diamond casino

    回复

  116. With thanks. Helpful stuff!
    die besten online casinos der welt [url=https://usaplayerscasino.com/#]online casino bitcoin[/url] online casino ДЌeskГЎ republika

    回复

  117. Thank you. Wonderful information!
    online casino free bonus no deposit no wagering [url=https://luckyusaplay.com/#]best online usa casinos[/url] play online casino real money

    回复

  118. Many thanks, I appreciate this!
    south african online casinos list [url=https://luckyusaplay.com/#]online casino bonuses[/url] main street vegas online casino

    回复

  119. Many thanks, I value it!
    best online casino bonus reddit [url=https://uscasinoguides.com/#]online casino bitcoin[/url] no deposit bonus online casino wv

    回复

  123. You said it adequately.!
    5 euro minimum deposit online casino [url=https://usagamblinghub.com/#]monkeytilt best online casino[/url] online holland casino spelen

    回复
联系我们

联系我们

(44)07934433023

在线咨询: QQ交谈

邮箱: info@bioengx.org

关注微信
微信扫一扫关注我们

微信扫一扫关注我们

关注微博
返回顶部