您的位置 首页 克隆与表达

如何使用Primer5进行引物设计

发布: 2017-05-11 2,680阅读 278评论

质粒构建第一步就是设计引物。首先大体了解一下引物设计的一些通用原则：
1. 引物长度一般在15~30 bp，最常用的是18~27bp；
2. 引物GC含量在40%~60%之间，Tm值最好在72度℃左右。Tm值简单粗暴的计算方法为Tm=4×(G+C)+2×(A+T)，或在此基础上减5度；
3. 引物3’端不能选择A，最好选择T，G/C的错配率介于A/T之间；
4. 以上为最主要的原则，另外还要注意引物的特异性、引物内部不能形成二级结构等原则，具体可以百度之；

当然以上原则并不一定非要完全符合，但是作为一个新手而言初期最好是严格遵守为妙。下面介绍如何利用Primer5设计出满意的引物
1. 如下图，首先点击File->New->DNA Sequence

2. 点击空白处Ctrl+V粘贴我们的CDS序列，选择As is，即我们复制的是什么样的序列就粘贴的什么样的序列。下面的依次是“反向序列粘贴”、“互补序列粘贴”“反向互补序列粘贴”。

3. 点击左上角的Primer，如下图，S=Sense(上引)，A=Antisense（下引）

4. 如果对现在的引物不满意，还可以点击Edit Primers编辑序列，如下图，我们删除掉末尾三个碱基，之后需要先点击Analyse，然后才能点击OK，我们可以看到正向引物已经从25个碱基变为22个碱基了。

最后点击Edit->Copy->Sense Primer，粘贴到Word中即可得到正向引物，反向引物Copy之后粘贴也会自动变为5’到3’的序列。所以非常方便，Primer 5还有很多强大的功能，大家可以自行探索。

1.39K赞
标签:



相关文章

发表回复

您的电子邮箱地址不会被公开。 必填项已用*标注

评论列表(278)

  1. Этот информативный текст выделяется своими захватывающими аспектами, которые делают сложные темы доступными и понятными. Мы стремимся предложить читателям глубину знаний вместе с разнообразием интересных фактов. Откройте новые горизонты и развивайте свои способности познавать мир!
    Узнать напрямую – http://www.frealms.ru

    回复

  2. Мы собрали для вас самые захватывающие факты из мира науки и истории. От малознакомых деталей до грандиозных событий — эта статья расширит ваш кругозор и подарит новое понимание того, как устроен наш мир.
    Доступ к полной версии – https://f5fashion.vn/thu-giup-con-nguoi-xuat-hien-se-dan-duong-den-nguoi-ngoai-hanh-tinh

    回复

  3. В статье представлены ключевые моменты по актуальной теме, дополненные советами экспертов и ссылками на дополнительные ресурсы. Цель материала — дать читателю инструменты для самостоятельного развития и принятия осознанных решений.
    Доступ к полной версии – https://walaoeh.live/2022/02/05/%E7%83%AD%E9%97%A8%E8%82%A1%E6%81%92%E6%BA%90%E7%82%BC%E6%B2%B9-%E4%B8%8A%E6%8C%91rm4-33

    回复

  4. Этот информативный текст отличается привлекательным содержанием и актуальными данными. Мы предлагаем читателям взглянуть на привычные вещи под новым углом, предоставляя интересный и доступный материал. Получите удовольствие от чтения и расширьте кругозор!
    Получить исчерпывающие сведения – https://www.classicbookshop.com/?attachment_id=807

    回复

  5. Мы предлагаем вам подробное руководство, основанное на проверенных источниках и реальных примерах. Каждая часть публикации направлена на то, чтобы помочь вам разобраться в сложных вопросах и применить знания на практике.
    Неизвестные факты о… – https://lrc-oberflaechenschutz.de/soundtrack-filma-lady-exclusive-music-2

    回复

  6. Этот информационный обзор станет отличным путеводителем по актуальным темам, объединяющим важные факты и мнения экспертов. Мы исследуем ключевые идеи и представляем их в доступной форме для более глубокого понимания. Читайте, чтобы оставаться в курсе событий!
    Погрузиться в научную дискуссию – https://www.ogar-polski.de/index.php/2021/05/09/meine-hunde

    回复

  7. Этот информационный обзор станет отличным путеводителем по актуальным темам, объединяющим важные факты и мнения экспертов. Мы исследуем ключевые идеи и представляем их в доступной форме для более глубокого понимания. Читайте, чтобы оставаться в курсе событий!
    Только факты! – https://machine-embroidery.dacha-drive.ru/encziklopediya-konstruirovaniya-i-modelirovaniya-modnoj-odezhdy

    回复

  8. Эта информационная заметка содержит увлекательные сведения, которые могут вас удивить! Мы собрали интересные факты, которые сделают вашу жизнь ярче и полнее. Узнайте нечто новое о привычных аспектах повседневности и откройте для себя удивительный мир информации.
    Почему это важно? – https://ac-consulting.ru

    回复

  9. Этот информационный материал собраны данные, которые помогут лучше понять текущие тенденции и процессы в различных сферах жизни. Мы предоставляем четкий анализ, графики и примеры, чтобы информация была не только понятной, но и практичной для принятия решений.
    Провести детальное исследование – https://www.cabinetaci.com/les-differents-prejudices

    回复

  10. В этой информационной статье вы найдете интересное содержание, которое поможет вам расширить свои знания. Мы предлагаем увлекательный подход и уникальные взгляды на обсуждаемые темы, побуждая пользователей к активному мышлению и критическому анализу.
    Узнай первым! – https://f5fashion.vn/nha-hang-spice-viet-tinh-te-am-thuc-truyen-thong-viet-giua-long-hoi-an

    回复

  11. В этой информационной статье вы найдете интересное содержание, которое поможет вам расширить свои знания. Мы предлагаем увлекательный подход и уникальные взгляды на обсуждаемые темы, побуждая пользователей к активному мышлению и критическому анализу.
    Получить полную информацию – http://kunstamedersee.de/?attachment_id=80

    回复

  12. Мы предлагаем вам подробное руководство, основанное на проверенных источниках и реальных примерах. Каждая часть публикации направлена на то, чтобы помочь вам разобраться в сложных вопросах и применить знания на практике.
    Читать дальше – https://www.novalife.it/il-mio-attila

    回复

  13. В статье представлены ключевые моменты по актуальной теме, дополненные советами экспертов и ссылками на дополнительные ресурсы. Цель материала — дать читателю инструменты для самостоятельного развития и принятия осознанных решений.
    Все материалы собраны здесь – https://shopkamin.ru

    回复

  14. Эта публикация дает возможность задействовать различные источники информации и представить их в удобной форме. Читатели смогут быстро найти нужные данные и получить ответы на интересующие их вопросы. Мы стремимся к четкости и доступности материала для всех!
    Переходите по ссылке ниже – http://webdetektivi.org/favicon_v

    回复

  15. В этой публикации мы предлагаем подробные объяснения по актуальным вопросам, чтобы помочь читателям глубже понять их. Четкость и структурированность материала сделают его удобным для усвоения и применения в повседневной жизни.
    Подробнее – https://giondragasuites.com/index.php/2023/06/22/the-art-of-negotiation-tips-for-successful-business-deals

    回复

  16. Публикация предлагает уникальную подборку информации, которая будет интересна как специалистам, так и широкому кругу читателей. Здесь вы найдете ответы на часто задаваемые вопросы и полезные инсайты для дальнейшего применения.
    Узнать напрямую – https://tandlaegernesydcentret.dk/hello-world

    回复

  17. Эта публикация дает возможность задействовать различные источники информации и представить их в удобной форме. Читатели смогут быстро найти нужные данные и получить ответы на интересующие их вопросы. Мы стремимся к четкости и доступности материала для всех!
    Подробнее – http://sochiinvestproect.ru

    回复

  18. В этой статье представлен занимательный и актуальный контент, который заставит вас задуматься. Мы обсуждаем насущные вопросы и проблемы, а также освещаем истории, которые вдохновляют на действия и изменения. Узнайте, что стоит за событиями нашего времени!
    Все материалы собраны здесь – http://detsad67rgd.ru

    回复

  19. Этот текст сочетает в себе элементы познавательного рассказа и аналитической подачи информации. Читатель получает доступ к уникальным данным, которые соединяют прошлое с настоящим и открывают двери в будущее.
    Обратитесь за информацией – https://www.ophthalmetryoptical.com/blog/tonometer-for-home-use

    回复

  20. Публикация приглашает вас исследовать неизведанное — от древних тайн до современных достижений науки. Вы узнаете, как случайные находки превращались в революции, а смелые мысли — в новые эры человеческого прогресса.
    Детальнее – http://chernila-kraski.ru

    回复

  21. Эта обзорная заметка содержит ключевые моменты и факты по актуальным вопросам. Она поможет читателям быстро ориентироваться в теме и узнать о самых важных аспектах сегодня. Получите краткий курс по современной информации и оставайтесь в курсе событий!
    Получить полную информацию – https://judithtempel.nl/polygon06-byghostlypixels

    回复

  22. Предлагаем вашему вниманию интересную справочную статью, в которой собраны ключевые моменты и нюансы по актуальным вопросам. Эта информация будет полезна как для профессионалов, так и для тех, кто только начинает изучать тему. Узнайте ответы на важные вопросы и расширьте свои знания!
    Изучить вопрос глубже – https://good88888.org/game-bai-cat-te

    回复

  23. Этот информативный текст выделяется своими захватывающими аспектами, которые делают сложные темы доступными и понятными. Мы стремимся предложить читателям глубину знаний вместе с разнообразием интересных фактов. Откройте новые горизонты и развивайте свои способности познавать мир!
    Обратиться к источнику – https://iejem.org/index.php/2023/02/09/issue-1-10

    回复

  24. Этот информативный текст выделяется своими захватывающими аспектами, которые делают сложные темы доступными и понятными. Мы стремимся предложить читателям глубину знаний вместе с разнообразием интересных фактов. Откройте новые горизонты и развивайте свои способности познавать мир!
    Получить больше информации – https://vistoweekly.com/chliphot

    回复

  25. В этой статье представлен занимательный и актуальный контент, который заставит вас задуматься. Мы обсуждаем насущные вопросы и проблемы, а также освещаем истории, которые вдохновляют на действия и изменения. Узнайте, что стоит за событиями нашего времени!
    Открыть полностью – https://quoteslife.site/inspiring-teamwork-and-collaboration-quotes

    回复

  26. В этом информативном тексте представлены захватывающие события и факты, которые заставят вас задуматься. Мы обращаем внимание на важные моменты, которые часто остаются незамеченными, и предлагаем новые перспективы на привычные вещи. Подготовьтесь к тому, чтобы быть поглощенным увлекательными рассказами!
    Перейти к статье – http://transqb.ru

    回复

  27. Эта публикация дает возможность задействовать различные источники информации и представить их в удобной форме. Читатели смогут быстро найти нужные данные и получить ответы на интересующие их вопросы. Мы стремимся к четкости и доступности материала для всех!
    Читать дальше – https://apolloboxingclub.ca/proper-nutrition-for-boxing-and-maintaining-work-life-balance

    回复

  28. Этот информационный материал собраны данные, которые помогут лучше понять текущие тенденции и процессы в различных сферах жизни. Мы предоставляем четкий анализ, графики и примеры, чтобы информация была не только понятной, но и практичной для принятия решений.
    Почему это важно? – https://www.zenraintrading.com/hello-world

    回复

  29. Этот информативный текст выделяется своими захватывающими аспектами, которые делают сложные темы доступными и понятными. Мы стремимся предложить читателям глубину знаний вместе с разнообразием интересных фактов. Откройте новые горизонты и развивайте свои способности познавать мир!
    Обратиться к источнику – https://enh.tw/%E4%BA%8C%E6%AC%A1%E9%9A%86%E4%B9%B3-%E6%A1%88%E4%BE%8B%E4%BA%8C

    回复

  30. Эта публикация дает возможность задействовать различные источники информации и представить их в удобной форме. Читатели смогут быстро найти нужные данные и получить ответы на интересующие их вопросы. Мы стремимся к четкости и доступности материала для всех!
    Ознакомиться с полной информацией – https://tp-hatsukaichi-seitai.com/2020/02/22/hello-world

    回复

  31. Этот информативный текст отличается привлекательным содержанием и актуальными данными. Мы предлагаем читателям взглянуть на привычные вещи под новым углом, предоставляя интересный и доступный материал. Получите удовольствие от чтения и расширьте кругозор!
    Более того — здесь – https://getnaturalzepbound.com/hello-world

    回复

  32. Этот текст сочетает в себе элементы познавательного рассказа и аналитической подачи информации. Читатель получает доступ к уникальным данным, которые соединяют прошлое с настоящим и открывают двери в будущее.
    Изучить аспект более тщательно – https://all4holidays.ru/?paged=27&cat=1

    回复

  33. В этом информативном тексте представлены захватывающие события и факты, которые заставят вас задуматься. Мы обращаем внимание на важные моменты, которые часто остаются незамеченными, и предлагаем новые перспективы на привычные вещи. Подготовьтесь к тому, чтобы быть поглощенным увлекательными рассказами!
    Более того — здесь – https://178evakuator178.ru/?paged=29

    回复

  34. Публикация приглашает вас исследовать неизведанное — от древних тайн до современных достижений науки. Вы узнаете, как случайные находки превращались в революции, а смелые мысли — в новые эры человеческого прогресса.
    Более того — здесь – https://dev.sabrinalonis.fr/stage-lax-studio-dimanche-12-mars-inscriptions-imminente

    回复

  35. Этот текст сочетает в себе элементы познавательного рассказа и аналитической подачи информации. Читатель получает доступ к уникальным данным, которые соединяют прошлое с настоящим и открывают двери в будущее.
    Выяснить больше – https://www.myprestigelab.com/capture-decran-2020-05-29-00-35-15

    回复

  36. Этот информационный обзор станет отличным путеводителем по актуальным темам, объединяющим важные факты и мнения экспертов. Мы исследуем ключевые идеи и представляем их в доступной форме для более глубокого понимания. Читайте, чтобы оставаться в курсе событий!
    Все материалы собраны здесь – https://psi-ko.it/component/k2/item/11-how-to-catch-the-happiness.html?start=35710

    回复

  37. Мы предлагаем вам подробное руководство, основанное на проверенных источниках и реальных примерах. Каждая часть публикации направлена на то, чтобы помочь вам разобраться в сложных вопросах и применить знания на практике.
    Подробнее – https://thepurposepartnershipco.com/hello-world

    回复

  38. Эта статья предлагает живое освещение актуальной темы с множеством интересных фактов. Мы рассмотрим ключевые моменты, которые делают данную тему важной и актуальной. Подготовьтесь к насыщенному путешествию по неизвестным аспектам и узнайте больше о значимых событиях.
    Расширить кругозор по теме – https://f5fashion.vn/update-biya-bajo-private-video-leaked-online-goes-viral-on-twitter-reddit

    回复

  39. Публикация предлагает уникальную подборку информации, которая будет интересна как специалистам, так и широкому кругу читателей. Здесь вы найдете ответы на часто задаваемые вопросы и полезные инсайты для дальнейшего применения.
    Лучшее решение — прямо здесь – https://melle-art.de/dsc02646-copy

    回复

  40. Этот информативный текст выделяется своими захватывающими аспектами, которые делают сложные темы доступными и понятными. Мы стремимся предложить читателям глубину знаний вместе с разнообразием интересных фактов. Откройте новые горизонты и развивайте свои способности познавать мир!
    Погрузиться в детали – https://almaxindustry.com/komatsu-pump-list

    回复

  41. Предлагаем вашему вниманию интересную справочную статью, в которой собраны ключевые моменты и нюансы по актуальным вопросам. Эта информация будет полезна как для профессионалов, так и для тех, кто только начинает изучать тему. Узнайте ответы на важные вопросы и расширьте свои знания!
    Исследовать вопрос подробнее – https://vistoweekly.com/showbizztoday-com

    回复

  42. В этой статье-обзоре мы соберем актуальную информацию и интересные факты, которые освещают важные темы. Читатели смогут ознакомиться с различными мнениями и подходами, что позволит им расширить кругозор и глубже понять обсуждаемые вопросы.
    Выяснить больше – https://vistoweekly.com/kecveto

    回复

  43. В этой статье-обзоре мы соберем актуальную информацию и интересные факты, которые освещают важные темы. Читатели смогут ознакомиться с различными мнениями и подходами, что позволит им расширить кругозор и глубже понять обсуждаемые вопросы.
    Подробнее тут – https://vyvod-iz-zapoya-1.ru/

    回复

  44. Этот информационный материал привлекает внимание множеством интересных деталей и необычных ракурсов. Мы предлагаем уникальные взгляды на привычные вещи и рассматриваем вопросы, которые волнуют общество. Будьте в курсе актуальных тем и расширяйте свои знания!
    Детальнее – https://vyvod-iz-zapoya-1.ru/

    回复

  51. In this awesome pattern of things you receive a B+ for effort. Exactly where you actually confused me personally was on the particulars. You know, it is said, details make or break the argument.. And it could not be more correct right here. Having said that, allow me say to you what exactly did do the job. Your text can be highly powerful and this is probably why I am taking the effort to opine. I do not make it a regular habit of doing that. Secondly, despite the fact that I can certainly see the leaps in reason you come up with, I am not necessarily convinced of how you seem to connect your details which in turn make your conclusion. For now I will subscribe to your issue however trust in the future you actually link your facts better.

    回复

  57. It’s impressive that you are getting thoughts from this article as well as from our dialogue made at this time.

    [url=https://www.farmaciacalamocha.com/1xbet-gives-bonuses-in-volleyball-betting/]farmaciacalamocha.com[/url]

    回复

  86. His son bucks on the lid as he turns beet red from his carnal machinations.

    回复

  93. Daddy smiled and said, “ that is my good boy. Don’t even want to leave your daddy’s Ripe socks on the floor. That’s the respect I love boy.” I then was told to clean his left foot. “Scrub these whitish paste out in my toenails. I want you to smell and place them in your mouth and let me see.” Daddy commented. It smelled and tasted like Brie cheese. Then I moved my tongue in between daddy’s toes. I cleaned up so well. Just thought I was finished. Daddy said,” the sole is clammy. It has nature feet oil after a whole day in the shoes, you think you finished fag. Keep working on that.” “Nope.” He says. Flatly. As he runs his hand over his still steely-hard length of his curved cock.

    回复

  95. Nicely put, With thanks.
    big red online casino [url=https://usacasinomaster.com/#]casino online casino[/url] casino online fund

    回复

  97. Amazing information. Appreciate it.
    live casino online app [url=https://luckyusaplay.com/#]casino games online free[/url] gta 5 online casino chips

    回复

  102. Nicely put, Many thanks.
    mate online casino [url=https://usaplayerscasino.com/#]deposit bonus online casinos[/url] sweeps cash casinos online

    回复

  104. Point well taken!.
    online casino bank [url=https://usagamblinghub.com/#]online live casinos[/url] best casino in world online

    回复

  106. Seriously a good deal of superb info.
    online casino free spins uk [url=https://usacasinomaster.com/#]online casino games[/url] 21 casino movie online

    回复

  107. With thanks. Ample information!
    sc casino online real money [url=https://luckyusaplay.com/#]casino live online[/url] casino online moçambique

    回复

  110. Regards! Very good information.
    best us online casino no deposit bonus [url=https://uscasinoguides.com/#]online casino usa no deposit bonus[/url] louisiana online casino real money

    回复

  111. Superb write ups, Regards.
    casino online facebook [url=https://usaplayerscasino.com/#]best online casinos that payout usa[/url] azartmania online casino

    回复

  114. You actually suggested this well.
    online casino website for sale [url=https://usacasinomaster.com/#]online casino no deposit bonus codes[/url] slots casino online real money

    回复

  118. Incredible lots of superb facts.
    casino online rating [url=https://uscasinoguides.com/#]usa casino online[/url] hyperino online casino

    回复

  119. Great advice. With thanks!
    die besten online casinos in Г¶sterreich [url=https://usaplayerscasino.com/#]online live casinos[/url] online casino that accepts ecopayz

    回复

  121. Perfectly spoken indeed! !
    trusted online casino roulette [url=https://usagamblinghub.com/#]new online casino no deposit bonus[/url] croc casino online

    回复

  123. You actually suggested this wonderfully!
    casino royale games online [url=https://luckyusaplay.com/#]top online casinos[/url] online casinos bitcoin

    回复

  128. Cheers! Excellent stuff.
    casino games online no download [url=https://uscasinoguides.com/#]best online casino no deposit sign up bonus[/url] best online casino jamaica

    回复

  129. Terrific data, Appreciate it.
    gold city online casino [url=https://usaplayerscasino.com/#]best online casino games[/url] supacasi online casino

    回复

  132. Reliable info. Appreciate it!
    online casino mit echtgeld startguthaben ohne einzahlung [url=https://usacasinomaster.com/#]casino games online[/url] paypal online casinos

    回复

  133. Effectively expressed of course. !
    online casino real money low deposit [url=https://luckyusaplay.com/#]online casinos[/url] super 7 online casino

    回复

  138. Thank you! Useful information!
    biggest online casino uk [url=https://usaplayerscasino.com/#]casino online games free[/url] virgin online casino app

    回复

  140. Good write ups. Cheers.
    online casino withdrawal limits [url=https://usacasinomaster.com/#]online american casinos[/url] firekirin online casino

    回复

  142. Amazing tons of awesome data.
    lucky winner online casino [url=https://luckyusaplay.com/#]no deposit online casinos[/url] online casino dragon link

    回复

  145. Thanks. Great stuff.
    bbb accredited online casino [url=https://uscasinoguides.com/#]brand new online casinos usa no deposit bonus[/url] avantgarde online casino

    回复

  146. Nicely put, With thanks!
    best online casino uk no wagering requirements [url=https://usagamblinghub.com/#]best online casino welcome bonus no deposit[/url] gta 5 online casino tricks

    回复

  148. You have made the point.
    casinos en chile online [url=https://usacasinomaster.com/#]casino online no deposit[/url] online casino in france

    回复

  150. Thanks, I value it!
    online casino brazil [url=https://luckyusaplay.com/#]casino games free online[/url] king billy casino online

    回复

  152. Fantastic content. Thank you.
    jugar gratis casino online [url=https://usagamblinghub.com/#]free casinos online[/url] 35 free online casino 2017

    回复

  157. Nicely put, With thanks!
    every game online casino [url=https://luckyusaplay.com/#]social casinos online[/url] parx casino online

    回复

  160. Amazing forum posts. Thanks!
    2 online casino [url=https://usagamblinghub.com/#]casinos online usa[/url] parx online casino no deposit bonus codes

    回复

  161. Information very well taken.!
    the online casino login [url=https://usacasinomaster.com/#]fastest payout online casino[/url] list of betsoft online casinos

    回复

  206. Great job on this article! It was engaging and informative, making complex ideas accessible. I’m eager to hear different viewpoints. Click on my nickname for more interesting content.

    回复
联系我们

联系我们

(44)07934433023

在线咨询: QQ交谈

邮箱: info@bioengx.org

关注微信
微信扫一扫关注我们

微信扫一扫关注我们

关注微博
返回顶部